ROSSАmed COVID-19 Isotherm
Reaktiv tavsifi
ROSSAmed COVID-19 ISOTHERM тўплами ва бошқа ПЗР тўпламлари ўртасидаги асосий фарқ вирус РНКсини колориметрик, ҳалқали изотермал амплификация орқали аниқлашдир. ПЗР усулидан фарқли ўлароқ, РНКни амплификацияси реакция аралашмасининг ҳароратнинг доимий кўрсаткичида, шунингдек самаралироқ ферментлар ёрдамида содир бўлади. Бу таҳлил вақтини бир неча марта қисқартиради, операцияларнинг минимал сони туфайли хатолик хавфини камайтиради. Сизга керак бўлган нарса – намунани 95 ℃ - 15 дақиқада қиздириш (фермент ингибицияга чидамли, шунинг учун РНК изоляцияси ва тозалаш босқичи талаб қилинмайди), реакция аралашмасини тайёрланг, унга намунани қўшинг, 65 ℃ да 45 дақиқа ичида инкубация қилинг. Экспресс тестни ўтқазиш вақти – 1 соат.
"ROSSAmed COVID-19 ISOTHERM" тўплами Вирусология илмий-тадқиқот институтида клиник ва лаборатория синовларидан ўтди, уларнинг давомида реагентлар тўплами россиялик ишлаб чиқарувчиларнинг реал вақт режимидаги ПЗР тест тизимлари билан таққосланди. Синовлар вирус концентрацияси паст ва юқори бўлган ижобий намуналарни, шунингдек, салбий намуналарни ўз ичига олди. Ижобий намуналарни, шу жумладан вируснинг концентрацияси паст бўлган намуналарни синовдан ўтказишда 96,1% ҳолларда ва салбий намуналарни синовдан ўтказишда 100% ҳолларда мосликлар аниқланди.
Xususiyatlari
- Сақлаш шароити : -16…-24°С
- Яроқлик муддати : 12 ой
- Текширувлар сони : 100
Batafsil tavsif
ПЗР кўп йиллар давомида нуклеин кислотани амплификациясининг асосий усули бўлиб келган, аммо молекуляр диагностикадаги замонавий ёндашувлар ПЗР натижаларини олишнинг содда ва тезкор усулларини талаб қилади. Махсус SARS-CoV-2 коронавирус РНК қисмларини аниқлаш ва идентификация қилиш учун мўлжалландан ROSSAmed COVID-19 ISOTHERM реактивлар тўплами намуналарни инновацион колориметрик, изотермик ва ҳалқали амплификация усулидан фойдаланади.
Усул принципи
Ҳалқали изотермик амплификация усули Bst-ДНК-полимараза томонидан катализланган занжирнинг силжиши билан нуклеин кислоталарнинг синтезига асосланади. Қўлланиладиган фермент амплификация билан бир вақтда кДНК синтези босқичини амалга ошириш имконини беради. Амплификация жараёнини учта асосий босқичга бўлиш мумкин:
1) асосий гантел шаклидаги структуранинг шаклланиши,
2) циклик амплификация босқичи,
3) циклларнинг чўзилиши ва такрорланиши босқичи.
Ушбу реакция натижасида бўшлиқда гулкарамга ўхшаш (cauliflower-like structures) тузилмаларни ҳосил қилувчи мақсадли қисмнинг тескари такрорланишнинг кўплаб конкатемерлари ҳосил бўлади. Аралашмага муҳитнинг рН қийматига сезгир бўлган бўйоқ қўшилади, кучайтирувчи маҳсулотлар муҳитнинг pH қийматини кислотали томонга силжитади, бу эса аралашманинг ранги ўзгаришига олиб келади, уни оддий кўз билан аниқлаш мумкин.
Натижаларни олиш
Таҳлил қилиш вақти 1 соат. Натижаларни рўйхатга олиш визуал тарзда амалга оширилади.
Натижалар
Ижобий Салбий
Хусусиятлари
Усулнинг ажралиб турадиган хусусиятлари орасида реакция маҳсулотларининг тез тўпланиши, аралашмаларга нисбатан паст сезгирлиги ва юқори ўзига хослигини қайд этиш мумкин.